无菌室,也称为接种室,是无菌处理的专门实验室,例如系统接种、纯化菌种。在微生物工作中,菌种的接种移植是主要的一项操作。该操作的特征是确保菌种的纯种并防止细菌污染。在一般环境的空气中,由于存在许多灰尘和其他细菌,很容易造成污染并严重干扰接种工作。
无菌房间设置
应根据经济和科学原则建立无菌室。基本要求如下:
(1)无菌室应有内、外有两个房间,里面是无菌室,外面是缓冲室。房间的体积不应太大,便于空气灭菌。内部区域为2×2.5 = 5m2,外部区域为1×2 = 2m2,高度为2.5m或更小。内外都应有天花板。
(2)内间应有滑动门,以减少空气的波动。门应设在离工作台远的位置;外门也应用于滑动门,门应位于离内间远的位置。 。
(3)在内间与外间墙壁上或隔扇上开一个小窗口,以便为接种过程的内外做必要的通道,以减少人们进出的次数,减少污染程度。小窗宽60cm、高40cm、厚30cm,内外均挂对拉窗扇。
(4)无菌室的体积小而严谨。使用一段时间后,室内温度很高,因此应提供通气窗。通气窗应设置在内室入口处的天花板上(离工作台远的位置),好是双层结构,外层是百叶窗,内层可以是板式窗扇。打开通气窗口循环空气,在内室中进行灭菌之前。有条件地安装恒温恒湿机。
无菌室内设备和用具
(1)无菌室内的工作台,无论使用何种材料和用途,都需要光滑的表面和工作台水平。
(2)在内室和外室中安装紫外灯(多为30W)。内室紫外线灯应安装在常工作的座位正上方,离地面2米,外室紫外线灯可安装在外室中央。
(3)外室应有专用工作服、鞋子、帽子、面罩、瓷盆和毛巾用Suer水、手动喷雾器和5%碳酸溶液。
(4)内室应有酒精灯、常用接种工具、不锈钢刀、剪刀、镊子、70%酒精棉球、工业酒精、载玻璃片、特殊蜡笔、记录本、铅笔、标签纸、胶水、废纸篓等。
(1)熏蒸:这是对无菌室进行彻底灭菌的措施。无菌室应该使用很长时间。当污染严重时,应该进行熏蒸。它可以用甲醛、乳酸或硫磺熏蒸。
(2)喷雾:每次使用无菌室之前。喷雾可以促进空气中颗粒和微生物的沉淀,防止桌面、地面上的尘埃飞扬并具有杀菌作用。喷洒5%的碳酸。
(3)紫外线照射:每次使用无菌室之前。紫外线具有良好的杀菌效果。通常,紫外灯应开启30至60分钟。
无菌室工作程序
(1)在无菌室中灭菌。紫外灯在每次使用前打开超过30分钟,内室和外室喷洒5%的碳酸。
(2)用肥皂洗手后,将所需设备带入外室;在外室更换灭菌消毒的工作服、工作帽和工作鞋,戴上口罩,然后用2%酚皂浸泡手2分钟。 。
(3)将各种所需物品移入内室检查位置、,在工作面上方喷洒5%碳酸和操作员站位,返回外室,然后进入内室10分钟。
(4)接种前,用70%酒精棉球擦手;在进行无菌操作时,动作要轻柔缓慢,尽量减少空气波动和地面灰尘。
(5)工作期间应注意安全。如果棉塞着火,请用手握住或用湿布包裹。不要用嘴吹它以免扩大燃烧。如果细菌培养物溢出或打碎有菌容器时,则用浸有5%碳酸的抹布涂抹。用浸有5%碳酸的抹布擦拭台面或地板,再用酒精棉球擦拭手,然后继续操作。
(6)在工作结束时,立即清洁台面,将不应存放在无菌室内的所有物品和废物从无菌室中取出,用5%碳酸喷洒无菌室,或打开紫外线灯30分钟。